密度梯度离心是什么?

2024-05-05 20:31

1. 密度梯度离心是什么?

密度梯度离心是用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度。
密度梯度离心是将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。
密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。分离活细胞的介质要求:1)能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高;2)PH中性或易调为中性;3)浓度大时渗透压不大;4)对细胞无毒。

密度梯度区带离心法(简称区带离心法):
区带离心法是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。
此法的优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合。
此法的缺点是:①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;③操作严格,不易掌握。

密度梯度离心是什么?

2. 密度梯度离心和差速离心的区别是什么?

一、原理不同
差速离心法:物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为 M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时,可得: F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r 。
密度梯度离心法:不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
二、转速不同
差速离心法:用多个离心转速。
密度梯度离心法:只用一个离心转速。

扩展资料:
不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。
参考资料来源:百度百科-密度梯度离心

3. 密度梯度离心法的工作原理

密度梯度离心法: 液体在离心时,其密度随转轴距离而增加。碱基GC 配对的双链DNA 片段密度较大,利用精密的密度梯度超离心技术可使切割适当片段的不同DNA 按密度大小分布开来。进而通过与某种放射性标记的mRNA 杂交来检验,分离相应的基因。非洲爪蟾rDNA.5sDNA 和海胆组蛋白基因就是这样分离得到的。密度梯度超离心技术不仅可以分离细胞中的DNA,也可以利用它分离到生物细胞中的某些目的基因的mRNA。一般细胞含mRNA 并不丰富,大多数细胞mRNA 只占总RNA 百分之几,mRNA 种类又非常多,各种mRNA 链长短不一,总mRNA 提取出来后,提取到铺在已预制了不同密度层次溶液介质的离心管中,人们可以利用密度梯度超离心技术将大小不同的mRNA 分离在不同密度层次上,然后可以根据所需的mRNA 的大小,在相应层次上提取。
密度梯度区带离心法(简称区带离心法),是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。此法的优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适应范围广,能像差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合。此法的缺点是:①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;③操作严格,不易掌握。
不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。

介质梯度应预先形成,介质的最大密度要小于所有样品颗粒的密度。常用的有蔗糖、甘油;

密度梯度液的制备用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度。

密度梯度离心法的工作原理

4. 密度梯度离心和差速离心的区别

密度梯度离心和差速离心的区别:
区别一:定义不同
差速离心法:差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的。
密度梯度离心法:用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。
区别二:原理不同
差速离心法:物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为 M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时,可得: F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r 。
密度梯度离心法:不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。

区别三:转速不同
差速离心法:用多个离心转速。
密度梯度离心法:只用一个离心转速。
区别四:密度不同
差速离心法:是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。
密度梯度离心:用此方法的物质密度有一定差异的。

5. 密度梯度离心法用于分离什么

可用来分离核酸、蛋白质、核糖体亚基及其它成分。

亦称平衡密度梯度离心法。用超离心机对小分子物质溶液,长时间加一个离心力场达到沉降平衡,在沉降池内从液面到底部出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子溶液,则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降,比溶剂密度小的部分就会上浮,最后在离心力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子带状物。利用这种现象,测定核酸或蛋白质等的浮游密度,或根据其差别进行分析的一种沉降平衡法。自1958年米西尔逊(M.Meselson),斯塔尔(F.W.Stahl),维诺格拉德(J.Vinograd)成功地分离了〔15N〕DNA和〔14N〕DNA以来,该法取得许多成果。

为得到必要的浓度梯度,多采用浓氯化铯溶液,所以有时也使用氯化铯浓度梯度离心法这个名称,还可采用氯化铷、溴化铯等溶液。通常利用分析超离心机,但在将细胞颗粒成分进行分离等以纯化为目的的情况,利用密度差,使用分离超离心机,采用预先制备好的蔗糖等的密度梯度。〔2〕采用蔗糖等一些小分子溶液,预先在分离超离心机的样品地内制备出密度梯度,在其上面再加上一层少量的大分子溶液后,离心,大分子就形成层状而沉降。若含有沉降系数不同的许多成分,就会出现许多层。这种情况采用适当的编排号码,取出样品池内的溶液,然后进行研究。这是与(1)不同的一种沉降速度法,除了以相同的目的被用于通常的沉降速度法外,在能取出分离物这点上是有优越性的。因多采用蔗糖密度梯度,所以亦称为蔗糖密度梯度离心法。按同样原理,也可使用分析超离心机进行测定。

密度梯度离心法用于分离什么

6. 密度梯度离心与等密梯度离心的区别

这是离心方式的一种.离心,就是在离心立场的作用下,通常在液态环境中,不同组分由于迁移率不同,经过一定的离心时间后,彼此分开,或者直接沉底,方便收集.
  您的问题更确切的说是要问:在密度梯度离心中,等密度离心和其它的离心方法之间的区别.
  也就是说,密度梯度离心是指待离心的组分在离心力场中迁移时,经过的介质(也就是离心管中的适合样品分离的缓冲液)密度不均一,通常是沿着离心力方向线性增大.如果是等密度梯度离心方式,那么,当待离心的组分迁移到和它密度相等的介质层时,便处于平衡状态,不再迁移.最终形成样品层.但是介质的密度梯度范围如果不包含待分离组分的密度值,而且混合样品中各组分在这样的介质中彼此也能分开的话,那么也可以达到分离,制备所需纯样品的目的,这种离心方法叫做速率-区带离心.
  通常,密度梯度离心为了分离金属颗粒物,生物大分子,亚细胞组分等.所需的离心机几乎都是超速离心机.
  有什么问题,欢迎追问.

7. 密度梯度离心和差速离心的区别

密度梯度离心和差速离心的区别如下:
一、原理不同:
差速离心法:物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为 M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时,可得: F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r 。
密度梯度离心法:不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。

二、转速不同:
差速离心法:用多个离心转速。
密度梯度离心法:只用一个离心转速。

扩展资料:
不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。

密度梯度离心和差速离心的区别

8. 差速离心和密度梯度离心的区别

差速离心和密度梯度离心的区别如下:
区别一:定义不同
差速离心法:差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的。
密度梯度离心法:用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。

区别二:原理不同
差速离心法:物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为 M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时,可得: F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r 。
密度梯度离心法:不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。

区别三:转速不同
差速离心法:用多个离心转速。密度梯度离心法:只用一个离心转速。
区别四:密度不同
差速离心法:是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。密度梯度离心:用此方法的物质密度有一定差异的。
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