杯碟法测定抗生素的原理是什么?

1. 杯碟法测定抗生素的原理是什么?

杯碟法利用了扩散原理,即抗生物质在混有指示菌的固体琼脂平板中的扩散,凡抗生物质能达到的最低抑菌浓度之处细菌不能生长因而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的直径与抗生物质浓度的对数有关。因此,在实验条件一定的情况下,抑菌圈的大小反映了菌种分泌抑菌物质能力的高低。

2. 简述K-B纸片琼脂扩散法原理及影晌因素。

1、k-b纸片琼脂扩散法原理：
k-b纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，
纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。在药物扩散的同时，纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长，而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同，抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（mic）呈负相关，即抑菌圈越大，mic越小。
2、k-b纸片琼脂扩散法影响因素：
①培养基的种类
进行细菌药敏试验所用的培养基种类较多，who要求统一使用mueller
hinton
(m-h)
琼脂作为k-b纸片法药敏试验的常规用培养基，该培养基中含有的低量胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷是与磺胺类药物和甲氧苄啶竞争的物质，若过量可能会逆转磺胺类和甲氧苄啶的抑菌效应，使得抑菌圈变小变模糊，甚至消失。
②k-b纸片的药量和ph值
用半饱和法制作的药敏纸片含药量一般为10μg，饱和法药敏纸片含药量为20μg。药敏纸片的ph值一般要求为中性，这样适合药物的活度。
③k-b纸片的保存及片间差
药敏纸片的质量是做好药敏试验的关键。
有的药敏纸片刚购买来抑菌圈就偏大或偏小，纸片之间存在着较大的片间差。因此，药敏纸片在用前必须检验其片间差和准确度，
只有达到标准后方可使用。同时，药敏纸片应注意保存，常规用量之外的药敏纸片最好放于-20℃保存。

3. 什么是杯碟法

是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，采用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生的抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。

4. 单相琼脂扩散试验原理、方法哪位能简单介绍一下？这类生物知识在哪里可以了解？

可以去生物帮那里了解，生物帮是生物方面比较优秀的网站，资讯信息比较丰富。 这是一种定量试验，将一定量的抗体混合于琼脂内，倾注于玻片上，凝固后，在琼脂层上打孔，再将抗原加入孔中，使其向四周扩散。抗原抗体复合物形成的沉淀环直径与抗原的浓度成正比。如事先用不同浓度的标准抗原制成标准曲线，则未知标本中的抗原含量即可从标准曲线中求出。本试验主要用于检查标本中各种免疫球蛋白和血清IgG含量。       材料 1.抗体：羊抗人IgG单价抗血清。 2.抗原：待检血清。 3.3%生理盐水琼脂、生理盐水、载玻片、直径3mm打孔器、小三角烧瓶、毛细滴管、湿盒。 可 参考： That can help you.Click  www.bio1000.com/zt/focus/agar.htm, Sign in account. 方法 1制备含抗体的琼脂板 取羊抗人IgG单价抗血清一瓶(效价1：80)，量取0.3ml于一小三角烧瓶中，加生理盐水11.7ml(40倍稀释混匀，置56℃水浴中恒温2~3分钟)。 取3%生理盐水琼脂一管，隔水加热使溶，然后置56℃水浴中，待琼脂温度降至56℃时，立即加入等量1：40稀释抗血清，迅速轻轻混匀，勿使产生气泡，迅速倾入载玻片上，每片3.5ml，待凝固后打孔。如下图所示。 2、稀释待检血清 将待检血清用生理盐水作40倍稀释， 3、打孔、加样 每份检样加两孔，加满(但不要溢出)，加样时毛细滴管尖端不要划破琼脂。 4、温育 将琼脂板置搪瓷盒，垫湿纱布或海绵以防干燥，37℃恒温箱24h。          结果观察与分析 测量并求出每份检样两孔的沉淀环平均直径，按照标准曲线求出IgG含量。

5. 琼脂扩散法有哪些

琼脂扩散法就是利用化合物可以在琼脂中扩散，使化合物扩散到的地方的微生物生长受到抑制，从而出现透明圈，初步判断该化合物有无抗菌活性。原理相同只是化合物载体不同。我只知道大概3种：1、滤纸片法，就是将化合物溶剂滴加到滤纸片上，然后将滤纸片贴到涂有微生物的固体培养基上，使化合物扩散；2、牛津杯法，先在平皿底部倒一薄层水琼脂，等凝结后放上牛津杯，再倒入混有微生物的培养基，凝固后将牛津杯取出，是培养基上形成孔，然后将化合物溶解加入到孔中，使之扩散；3、琼脂块法，等微生物在固体培养基上生长好后，将具体下方的琼脂切块取下，放到涂有微生物的固体培养基上，使化合物扩散。
仅供参考。

6. 琼脂糖双扩散法是什么

双向琼脂扩散试验 是将半固体琼脂倾注于平皿内或玻片上，待其凝固后，在琼脂板上打孔，将抗原、抗体分别注入小孔内，使两者相互扩散。如果抗原、抗体相互对应，浓度、比例适当，则一定时间后，在抗原、抗体孔之间出现清晰可见的沉淀线。双向琼脂扩散法可用来分析溶液中的多种抗原。一对抗原、抗体系统只能形成一条沉淀线，不同的抗原抗体系统在琼脂中扩散的速度不同，可在琼脂中形成不同的沉淀线。本法主要是用于检测血清中各种免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙肝表面抗原等。缺点是需要时间过长，灵敏度不高。

7. 简述用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的基本原理和主要操作步骤

用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能
原理:噬菌体的效价即1mL样品中所含侵染性噬菌体的粒子数。效价的测定一般采用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上，一般一个噬菌体产生一个噬菌斑，故可根据一定体积的噬菌体培养液所出现的噬菌斑数，计算出噬菌体的效价。此法所形成的噬菌斑的形态、大小较一致，且清晰度高，故计数比较准确，因而被广泛应用。
方法:双层琼脂平板法
1
倒下层琼脂
   
融化下层培养基，倒平板（约10mL/皿）待用。
2
倒上层琼脂 
   
融化上层培养基，待融化的上层培养基冷却至50℃左右时，每管中加入敏感指示菌
(大肠杆菌)
菌液0.2mL，待检样品液或上述噬菌体增殖液0.2～0.5mL，混合后立即倒入上层平板铺平。
3
恒温培养
   
30℃恒温培养6～12h观察结果。
4
观察结果
   
如有噬菌体，则在双层培养基的上层出现透亮无菌圆形空斑——¬¬¬¬噬菌斑

8. 琼脂扩散法有什么别称？

琼脂扩散法又称圆筒平板法。用于测定抗生素效价的生物学定量方法之一。标准的方法是以20毫升的琼胶培养基放入陪替氏培养皿内做成平面，上面加上预先培养的试验标准菌种，例如掺入了葡萄球菌的琼胶4毫升，而使之凝固，上面再放上一个外径8毫米的不锈钢圆筒，筒内倒满青霉素稀释液之后，在35～37℃培养12～16小时。由于圆筒周围产生浓度梯度，葡萄球菌的繁殖被阻止于有效浓度范围之内而形成圆形的透明带。其直径d与青霉素浓度c之间的关系如下式所示：d=klog10c+a（k、a为常数）
与标准青霉素液相比较，可求得青霉素浓度。测定链霉素时用枯草菌，氯霉素用大肠菌，四环素用八连球菌作繁殖试验。此外还有用圆形滤纸代替圆筒，使被检液渗入的滤纸法。